Якість зразків із голок EBUS-TBNA і тестування молекулярної патології

Нові вимоги до вибору голок для аналізів тканинних ядер, клітинних блоків, NGS і PD-L1

https://profed.olympuschina.com/gs/thoracicsurgery/12628/

В епоху прецизійної онкології,EBUS-TBNAповинен відповідати не просто "Це рак?" але також забезпечують: гістологічне визначення підтипу (аденокарцинома/плоскоклітинний рак/великоклітинний рак/NSCLC-NOS), Ki-67, фарбування TTF-1/p40, експресію PD-L1 (клони 22C3/SP142 тощо) та профіль мутації драйвера (EGFR, ALK, ROS1, BRAF, MET, RET, KRAS і широкі панелі NGS). Для цього вимагається вихід ДНК, який зазвичай коливається від 10 до 250 нг на процедуру (залежно від платформи), при цьому зберігається архітектура тканини для IHC-можливостей, що перевищує можливості традиційних цитологічних мазків FNA. Отже, конструкція голки EBUS розвивається в напрямку «захоплення тканини» (FNB/core yield).

Типи зразків і співвідношення голок:

• FNA (аспірація тонкою голкою):​ Одно-зрізані назад-голки 21G/22G + аспірація під негативним тиском → кластери клітин + фрагменти строми → мазки (Diff-Quik/H&E) + блок клітин. Клітинні блоки дозволяють провести IHC і деякі молекулярні тести, але обмежений об’єм тканини може перешкодити адекватності ДНК для цілого-екзома або великих панелей NGS.
• FNB (тонкоголкова біопсія):​ Голки Franseen із потрійним-краєм, коронним-різом або ProCore зі зворотним-скосом → тканинні смужки/мікро-стрижні → фіксовані, вбудовані ділянки. Зберігає архітектуру тканини, забезпечуючи чудову якість IHC і більший вихід ДНК/РНК порівняно з еквівалентними клітинними блоками FNA.
• Голки 19G Large-Lumen:​ Більший внутрішній діаметр аспірує невеликі серцевини тканин або більші об’єми зразків, придатних для мультиплексного тестування, хоча необхідна пильність щодо забруднення крові, що впливає на якість зразка.
• Інтеграція ROSE (швидка оцінка на-сайті):​ -Цитопатологи/техніки на місці попередньо оцінюють мазок, оцінюючи «адекватну клітинність», некроз, гранульоми чи лімфоїдну тканину, керуючи рішеннями про припинення відбору або зміну станції. ROSE зменшує середні проходи голки (часто 3-4 проти . 6-7 без ROSE) і покращує показники адекватності зразка. Деякі центри використовують фазово-контрастну мікроскопію для сортування клітинних блоків.

Наслідки для вибору голки за допомогою молекулярного тестування:​ Пацієнтам з НДКРЛ, які проходять цільову та імунотерапію, бажано віддавати перевагу голкам 19G FNB або 21G Franseen FNB, якщо вони доступні, забезпечуючи відбір зразків принаймні з 2-3 станцій для створення як клітинних блоків, так і тканинних ядер. Тільки для цитологічного скринінгу можуть використовуватися голки 22G FNA, але потрібно збільшити кількість проходів і підготувати клітинний блок. Дослідження свідчать про те, що показники успішності NGS є вищими для зразків, отриманих за допомогою голок 19G, порівняно з 22G FNA, особливо для багатих на строму або малоклітинних пухлин.

Рекомендації щодо обробки зразків (часто детально описані в інструкціях із використання - IFU):​ Негайно промийте просвіт голки після{0}}пункції буфером BSA/PBS у пробірку для збору → обробіть до клітинного блоку (фіксація у формаліні → заливка в парафін) або зафіксуйте ядра тканини безпосередньо у формаліні. Запобігайте висиханню просвіту, щоб уникнути дегенерації клітин. Управляйте засміченням, обережно просуваючи стилет або застосовуючи короткі повітряні поштовхи-, щоб підкреслити функціональне призначення стилета (запобігання засміченню + збереження цілісності зразка).

Підсумовуючи, вибір голки EBUS-TBNA змінюється від «просто проникаючої» до «налаштування типу голки та процедурного процесу на основі вимог молекулярної патології». Ця еволюція є центром міждисциплінарної співпраці між медичними онкологами, патологами та інтервенційними пульмонологами.